使用 LUNA-III™ 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行可靠且具有重復(fù)性的細(xì)胞計(jì)數(shù)

關(guān)鍵詞：設(shè)備間與設(shè)備內(nèi)偏差、一致性、可重復(fù)性、可靠性、自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

1 引言

在生物技術(shù)研究中，精確的細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)維持實(shí)驗(yàn)完整性至關(guān)重要。細(xì)胞計(jì)數(shù)的差異可能會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯著差異，特別是在細(xì)胞治療生產(chǎn)、質(zhì)量控制和生物制造等領(lǐng)域，精確的細(xì)胞定量對(duì)確保產(chǎn)品質(zhì)量和符合監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)具有決定性作用。點(diǎn)成LUNA-III™自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀為科研人員提供了一種經(jīng)濟(jì)高效的解決方案，可實(shí)現(xiàn)精確可靠的細(xì)胞計(jì)數(shù)。本研究評(píng)估了點(diǎn)成LUNA-III™的性能表現(xiàn)，重點(diǎn)分析其在單臺(tái)設(shè)備和多臺(tái)設(shè)備間保持結(jié)果一致性的能力，強(qiáng)調(diào)減少實(shí)驗(yàn)流程中差異性的重要性。

2 材料與方法

所有細(xì)胞計(jì)數(shù)均采用點(diǎn)成LUNA-III™默認(rèn)檢測(cè)程序。為評(píng)估設(shè)備內(nèi)偏差，使用三臺(tái)點(diǎn)成LUNA-III™按照標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制程序對(duì)標(biāo)準(zhǔn)微球進(jìn)行七次重復(fù)計(jì)數(shù)。設(shè)備之間的偏差則通過(guò)五臺(tái)不同的點(diǎn)成LUNA-III™進(jìn)行驗(yàn)證。所有測(cè)試均使用裝載在點(diǎn)成LUNA™細(xì)胞計(jì)數(shù)載片上的標(biāo)準(zhǔn)微球（貨號(hào)B13101）。

2.1 點(diǎn)成LUNA-III™設(shè)備內(nèi)與設(shè)備間的偏差評(píng)估

實(shí)驗(yàn)采用3T3細(xì)胞系，使用含10%胎牛血清和1%雙抗的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)胞活力檢測(cè)采用0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色液（貨號(hào)T13101）。此外，使用六種NIST可追溯粒徑標(biāo)準(zhǔn)（9.98、20.85、30.04、43.33、50.00和57.43um）來(lái)驗(yàn)證粒徑測(cè)量的準(zhǔn)確性。

2.2 NIST可追溯粒徑標(biāo)準(zhǔn)的準(zhǔn)確性

如表1所示，所有檢測(cè)結(jié)果均保持良好一致性，總細(xì)胞濃度、平均細(xì)胞尺寸及總細(xì)胞數(shù)量等參數(shù)高度吻合。細(xì)微的變動(dòng)（CV值約為1%）可能源于在使用設(shè)備進(jìn)行重復(fù)細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)重新插入LUNA細(xì)胞計(jì)數(shù)載玻片造成的。

表1. 點(diǎn)成LUNA-III™設(shè)備內(nèi)偏差分析。使用三臺(tái)不同設(shè)備對(duì)三批次標(biāo)準(zhǔn)微球進(jìn)行檢測(cè)，

每臺(tái)設(shè)備對(duì)每批樣本進(jìn)行五次重復(fù)計(jì)數(shù)。

設(shè)備間重現(xiàn)性通過(guò)五臺(tái)點(diǎn)成LUNA-III™對(duì)同批次標(biāo)準(zhǔn)微球的檢測(cè)進(jìn)行評(píng)估。如表2所示，設(shè)備間差異很低，所有測(cè)量參數(shù)的變異系數(shù)（CV）均保持在2%以下，充分證明了不同設(shè)備間的高度一致性，確保無(wú)論使用哪臺(tái)設(shè)備都能獲得可靠的結(jié)果。

表2. 點(diǎn)成LUNA-III™設(shè)備間偏差分析。使用五臺(tái)不同LUNA-III™設(shè)備對(duì)同一批次標(biāo)準(zhǔn)微球進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)兩次實(shí)驗(yàn)。

3 結(jié)論

本研究證實(shí)點(diǎn)成LUNA-III™自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在設(shè)備內(nèi)和設(shè)備間的檢測(cè)中均能提供準(zhǔn)確且可重復(fù)的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。所有檢測(cè)參數(shù)變異系數(shù)（CV）持續(xù)低于2%，充分展現(xiàn)該設(shè)備在細(xì)胞濃度和尺寸測(cè)定方面的高度可靠性。這些結(jié)果證實(shí)了點(diǎn)成LUNA-III™作為一款科研領(lǐng)域值得信賴(lài)的細(xì)胞定量工具，能夠?yàn)檠芯咳藛T提供精確的細(xì)胞定量結(jié)果。